Análise da expressão de microRNAs, receptores OX40 e CD40L, e do agregado de plaquetas-leucócitos no câncer gástrico / Analysis of the expression of microRNAs, OX40 and CD40L receptors, and platelets-leukocytes aggregation in gastric cancer

O prognóstico dos portadores de câncer gástrico tem melhorado pouco nas últimas décadas e o melhor entendimento das vias moleculares e as interações imunes no microambiente tumoral podem revelar novas possibilidades de tratamento. O ambiente tumoral é composto por células do sistema imune, que refletem a tentativa desse sistema em promover uma resposta antitumoral. Complexas interações entre células e mediadores imunes no microambiente tecidual regulam o crescimento de tumores, progressão, metástase e angiogênese. O entendimento das alterações da imunidade na população com câncer gástrico (CG) permitirá a intervenção terapêutica para melhorar a resposta à cirurgia e à quimioterapia. Objetivo: comparar a expressão de miRNA em tecidos de pacientes com câncer gástrico e controles saudáveis para encontrar miRNAs desregulados no câncer gástrico e usar ferramentas de bioinformática para determinar a possível influência desses miRNAs no sistema imunológico. Avaliar a formação de agregados plaquetas-leucócitos circulantes, bem como os níveis de ativação plaquetária (CD62p+, CD40L) desses conjugados a leucócitos em pacientes com CG. Quantificar a expressão de moléculas costimulatórias da resposta imune (OX40) em linfócitos T de pacientes com CG. Métodos: é um estudo do tipo corte transversal, exploratório e translacional realizado no Hospital de Câncer de Pernambuco, Laboratório de Pesquisa Translacional do Instituto de Medicina Integral Prof. Fernando Figueira e Centro Internacional de Pesquisa (CIPE) do AC Camargo entre 2015 a 2018. Foram avaliados 83 pacientes com câncer gástrico e 69 controles. Foram determinados os níveis de expressão de microRNAs no tecido tumoral gástrico em comparação aos da mucosa gástrica normal por técnica de reação em cadeia da polimerase (qPCR - TaqMan). Foram realizadas as análises dos niveis linfócitos T e B, OX40, CD40L e de agregado de plaquetas no sangue periférico por citometria de fluxo. Resultados: As análises revelaram um miRNA mais expresso (miR-196a-5p) e dois significativamente menos expressos (miR-374a-5p e miR-375) em comparação ao grupo controle. Pacientes com estádio IV (metástatico) apresentaram uma diminuição significativa na expressão do miR-374-5p quando comparados aos pacientes não metastáticos (p=0.03). Com uso de plataformas de bioinformática, foram observadas várias vias que sofrem influência dos microRNAs desregulados e que interagem com genes envolvidos com a resposta imune celular, moléculas de adesão celular e migração celular. Foram encontrados níveis elevados de expressão de OX40 em linfócitos T, monócitos e neutrófilos de pacientes com neoplasia gástrica (p<0.0001), entretanto, os níveis de OX40 foram reduzidos nos grupos com neoplasia estádio III/IV quando comparados ao estádio I/II. Observamos níveis elevados de agregados de plaquetas-linfócitos T e plaquetas-linfócitos B no sangue de pacientes GC com estágio IV quando comparados com os estágios I, II e III, e grupo controle (p <0,05). Níveis reduzidos de agregados plaquetas-linfócitos totais com expressão de CD40L foram observados no estádio IV da doença (p<0,05). Níveis elevados de plaquetas ativadas e agregados de plaquetas-monócitos ativados (CD62p+) foram observados em pacientes GC quando comparados ao grupo controle (p<0,05). Conclusão: Os resultados deste estudo permitem concluir que existem alterações de mecanismos moleculares (miRNA) e celulares envolvidos na regulação e ativação da resposta imune, sendo associadas à progressão e metástase no GC

The prognosis of gastric cancer patients has not been improved in the last decades and the the understanding of the molecular immune pathways and how immune interactions happens on tumoral microenvironment, open new possibilities of treatment. The tumor environment is infiltrated by cells of the immune system, which reflect an antitumor response. Complex interactions between microenvironmental cells and mediators regulate tumor growth, progression, metastasis and angiogenesis. The knowledge of the immunity in the population with gastric cancer will allow therapeutic intervention to improve the response to surgery and the chemotherapy. Objective: our primary goal was to compare the miRNA expression in tissues from primary gastric cancer patients and healthy controls to find miRNAs dysregulated in gastric cancer and used bioinformatics tools to determine potential roles of these miRNAs in the immune system. We conducted a secondary analysis to evaluate the formation of circulating platelet-leucocyte conjugates as well as the CD40L levels conjugate to leucocytes in GC and finally, samples were analysed for levels of costimulatory molecules related to the immune response (OX40) in GC. Methods: A cross-sectional, translational and exploratory study carried out at the Hospital de Cancer de Pernambuco, Translational Research Laboratory of the Instituto de Medicina Integral Prof. Fernando Figueira and AC Camargo International Research Center (CIPE) from 2015 to 2018, involving 83 patients with gastric cancer and 69 controls. Expression levels of microRNAs in gastric tumor tissue and normal gastric mucosa were determined by polymerase chain reaction technique (qPCR - TaqMan). Analyzes of T and B lymphocytes, OX40, CD40L and platelet aggregate levels were performed in peripheral blood by flow cytometry. Results: The results revealed a more express miRNA (miR-196a-5p) and two significantly less expressed (miR-374a-5p and miR-375) compared to the control group. Patients with stage IV (metastasis) showed a significant decrease in miR-374-5p expression when compared to non-metastatic patients (p = 0.03). Bioinformatics analysis suggested that the pathways regulated by these differentially expressed miRNAs were related to the immune response, cell adhesion, and cell migration. High levels of OX40 expression were found in T lymphocytes, monocytes and neutrophils of patients with gastric neoplasia (p <0.0001); however, OX40 levels were reduced in groups with stage III / IV neoplasia when compared to stage I / II. We observed higher levels of platelet-T lymphocyte aggregate (P-T lymp) and platelet-B lymphocyte aggregate (P-B lymp) in the peripheral blood (PB) of GC patients with stage IV when compare with stages I-II-III, and control group (p<0,05). Reduced levels of CD40L+ Platelet-total lymphocyte (P-lymp) were observed at stage IV of the disease (p<0.05). High levels of CD62p+ platelets and CD62p+ platelets-monocyte aggregate were observed GC patients when compare to control group (p<0.05). Conclusion: The results of this study allow us to conclude that there are alterations of molecular mechanisms (miRNA) and cellular mechanisms involved in the regulation and activation of the immune response and associated to the progression and metastasis in GC

Surgical treatment of clinically early-stage endometrial carcinoma without systematic lymphadenectomy / Tratamento cirúrgico do câncer de endométrio em estágio clínico precoce sem linfadenectomia radical.

Objective: the main aim of this study was to describe the authors’ experience with the surgical treatment of endometrial cancer without systematic lymphadenectomy. Methods: a retrospective cohort study was carried out on a subset of patients suffering of clinically early-stage endometrial carcinoma who underwent hysterectomy and salpingo-oophorectomy without systematic (radical) lymph nodes dissection at our centers from June, 2002, to November, 2011. Descriptive statistics were explored as medians (interquartile range) or frequencies (percentages), as appropriated, and the Kaplan–Meier method was applied for survival estimation. Results: eighty-three patients who underwent surgical treatment with no lymph node dissection (n = 20; 24.1%) or with only a sampling procedure (n=63; 75.98%) were selected for analysis. Among these patients, 27 (32.53%) underwent surgery alone and 56 (67.46%) received some adjuvant treatment. Postoperative complications occurred in five patients (6.02%). Over a median follow-up of 27.4 months (Q25 = 13.7 – Q75 = 46.5), 15 (18.07%) patients suffered from relapses and 11 deaths occurred as result of disease recurrence. Cumulative 1, 2 and 3-year disease- free survivals were 97.32, 91.18 and 78.02%, respectively. Conclusion: on a case-by-case basis, the surgical treatment of clinically early-stage endometrial carcinoma without systematic lymphadenectomy did not seem to decrease survival outcomes and presented low rates of surgical morbidity in our experience, but was also related to a high rate use of adjuvant therapy. .

Objetivo: descrever a experiência dos autores com o tratamento cirúrgico do câncer de endométrio em estádio precoce sem linfadenectomia radical. Métodos: realizou-se estudo de coorte retrospectivo envolvendo um subgrupo de pacientes com câncer de endométrio em estágio clínico precoce tratadas com histerectomia e salpingo-ooforectomia sem linfadenectomia radical, em dois centros pernambucanos, de junho de 2002 a novembro de 2011. As variáveis foram descritas como mediana (intervalo interquartílico) ou frequências (percentuais), utilizando- se o método de Kaplan-Meier para a estimativa das taxas de sobrevivência. Resultados: oitenta e três pacientes submetidas a tratamento cirúrgico sem dissecção linfonodal (n = 20, 24,1%) ou com dissecção apenas por amostragem (n = 63; 75,98%) foram selecionadas para análise. Entre essas pacientes, 27 (32,53%) foram tratadas somente com cirurgia e 56 (67,46%) receberam tratamento adjuvante. Cinco pacientes apresentaram complicações pós-operatórias (6,02%). Durante o acompanhamento mediano de 27,4 meses (Q25 = 13,7 - Q75 = 46,5), 15 (18,07%) pacientes apresentaram recorrência, dentre as quais 11 faleceram em decorrência da recidiva neoplásica. Observou-se sobrevivência cumulativa proporcional livre de doença em um, dois e três anos de 97,32, 91,18 e 78,02%, respectivamente. Conclusão: em um contexto de indicação caso-a-caso, o tratamento cirúrgico do câncer de endométrio em estádio precoce sem linfadenectomia radical parece não ter prejudicado a sobrevivência e apresentou baixas taxas de morbidade cirúrgica em nossa experiência, mas também foi acompanhado de elevada utilização de terapia adjuvante. .

Qual a importância do número de linfonodos pélvicos dissecados para o estadiamento locorregional do câncer de colo uterino? / How important is the number of pelvic lymph node retrieved to locorregional staging of cervix cancer?

OBJETIVO: Avaliar a importância do número de linfonodos pélvicos dissecados para o estadiamento locorregional de pacientes portadoras de câncer do colo uterino com estadiamento FIGO IA2 a IB2, submetidas a tratamento cirúrgico radical. MÉTODOS: Estudo de corte transversal incluindo pacientes submetidas à histerectomia radical tipo II de Piver e linfadenectomia pélvica, em dois centros pernambucanos, entre janeiro de 2001 e dezembro de 2008. Utilizou-se análise da área sob curva ROC como medida-resumo do desempenho do número de linfonodos dissecados para a predição do acometimento metastático linfonodal pélvico. Adicionalmente, também se avaliou a relação entre essas variáveis, usando a regressão logística e o teste exato de Fisher. RESULTADOS: A avaliação anatomopatológica incluiu 662 linfonodos dissecados (mediana=9, q25=6 - q75=13) de 69 pacientes. A avaliação da área sob curvas ROC revelou AUC=0,642 para a predição do estadiamento linfonodal pélvico pelo número de linfonodos dissecados. AUCs de 0,605 e 0,526 foram observadas quando se classificaram as pacientes, utilizando-se 10 e 15 linfonodos como pontos de corte, respectivamente. Por regressão logística, evidenciou-se odds-ratio de 0,912 (IC95%=0,805-1,032; p=0,125). A dissecção de ≥10 ou ≥15 linfonodos não se associou ao achado anatomopatológico de comprometimento metastático dos linfonodos pelo teste de Fisher (p=0,224 e p=0,699, respectivamente). CONCLUSÃO: O número de linfonodos dissecados não se correlacionou com comprometimento metastático linfonodal pélvico nessa casuística, o que sugere que a dissecção de um maior número de linfonodos não incremente o estadiamento locorregional do câncer de colo uterino.

OBJECTIVE: To explore how important is the number of pelvic lymph nodes dissected for the nodal staging in FIGO IA2-IB2 cervical cancer, submitted to radical surgical treatment. METHODS: A cross-sectional study was carried out on patients who underwent Piver class II radical hysterectomy and pelvic lymphadenectomy, in two centers in the state of Pernambuco, from January, 2001 to December, 2008. The analysis of the area under the ROC curve was adopted as a summary-measure of discriminatory power of the number of nodes dissected in predicting the pelvic nodal status. Additionally, we also confirm our findings using logistic regression and the Fisher's exact test. RESULTS: The postoperative pathological study included 662 pelvic lymph nodes dissected (median per-patient=9, q25=6 - q75=13) from 69 patients. The ROC curve analysis revealed AUC=0.642, for the discriminatory value of the number of nodes dissected in predicting the pelvic nodal status. Similar findings were found after categorization using 10 and 15 lymph nodes as cut-offs (AUC=0.605 and 0.526, respectively). Logistic regression revealed odds ratio of 0.912 (95%CI=0.805-1.032; p=0.125) for the predictive value of the number of nodes dissected, and a number of nodes ≥10 or ≥15 lymph nodes was not significantly associated with the nodal status by the Fischer's exact test (p=0.224 and p=0.699, respectively). CONCLUSION: The number of pelvic lymph nodes dissected did not correlate with pelvic lymph node metastatic involvement. This study suggests that dissection of a greater number of lymph nodes does not increase locoregional nodal staging in cervical cancer.

Autonomização gástrica prévia a faringolaringoesofagectomia total minimamente invasiva com pull-up gástrico para tratamento de câncer de esôfago cervical / Minimally invasive gastric autonomization before total pharyngolaryngoesophagectomy with gastric pull up for the treatment of cervical esophageal cancer

O câncer de esôfago cervical é uma doença rara. O melhor tratamento é o cirúrgico, porém com muitas complicações. Portanto, sugerimos, demonstrando dois casos operados, um acesso minimamente invasivo (laparoscópico e/ou toracoscópico) com faringolaringectomia total e autonomização do tubo gástrico previamente, com o intuito de diminuir a incidência de fistula.

The cervical esophagus cancer is a rare disease. The best treatment is the surgical one. However, it can present many complications. Therefore, we suggest, demostrating two operated cases, a minimally invasive access (laparoscopic and/or thorascopic) with total pharyngolaryngectomy and autonomization of the gastric tube previously in order to decrase the incidence of leak.